淺談顯微鏡的分辨率?
顯微鏡的分辨率用它能清晰地分辨試樣上兩點間的較小距離。分辨率決定了顯微鏡分辨試樣上細節(jié)的程度。顯微鏡的物鏡是使物體放大成一實像,目鏡的作用是使這個實像再次放大;這就是說目鏡只能放大物鏡已分辨的細節(jié),物鏡未能分辨的細節(jié),決不會通過目鏡放大而變得可分辨。因此顯微鏡的分辨率主要取決于物鏡的分辨率。對于一定波長的入射光,物鏡的分辨率完全取決于物鏡的數(shù)值孔徑;數(shù)值孔徑越大,分辨率就越高。
為了充分利用物鏡的分辨率,使操作者看清已被物鏡分辨出的組織細節(jié),顯微鏡必須有適當?shù)姆糯舐省H搜劬δ芸辞宓慕M織細節(jié)對眼睛的視角應大于眼睛的極限分辨角。
焦深(垂直分辨率)
焦深是指物鏡對高低不平的物體能夠清晰成像的能力。當顯微鏡準確聚焦于某一物面時,如果位于其前面及后面的物面仍然能被觀察者看清楚,則該較遠亮平面之間的距離就是焦深。物鏡的焦深組要取決于物鏡的數(shù)值孔徑。
工作距離與視場范圍
物鏡的工作距離是指顯微鏡準確聚焦后,試樣表面與物鏡的前端之間的距離。物鏡的放大率越高,工作距離越短。因此觀察調(diào)焦時需要格外細心,一般應使物鏡朝離開實物方向運行。
視場范圍是指顯微鏡中所觀察到的試樣表面區(qū)域的大小。視場范圍與物鏡的放大率成反比。普通物鏡初次放大實像的直徑一般為18mm。平視場物鏡初次放大實像直徑可達28mm,視場范圍大大增加。